定量单宁检测分析诚信企业 华士特生物技术公司

单宁广泛存在于植物的芽、叶、根、树皮和果实以及寄生于植物的昆虫所产生的虫瘿中，主要用于食品、化妆品、革鞣、造纸、墨水、印染、橡胶、冶金等工业以及水处理等方面，也可作为蛋白质的沉淀剂、啤酒和葡萄酒的澄明剂、橡胶的凝结剂等。

我公司针对单宁物质，建立一整套的检测方法，可提供总单宁含量检测、单宁单体含量检测、单宁分子量检测等。详见下表。

单宁种类很多，分子结构复杂，差异也大，但可分成二大类：可水解鞣质（单宁酸，tannin acid）与缩合鞣质(condensed tannin)两种。

可水解鞣质具有酯式或甙式结构，大多数由没食子酸（Gallic acid）或其衍生物与葡萄糖结合而成，糖上的每一个醇羟基都与没食子酸上的一个羟基结合成酯，可被酸、碱、酶水解。含这类鞣质的中草药有、没食子、石榴果皮等。水解鞣质在1药上已提纯应用为1炎收敛药，名鞣酸。没食子酸（Gallic acid）及单宁酸（可水解鞣质，tannin acid）标准品可以获得，可以利用HPLC分析、定量。

缩合鞣质 一般由1茶素（Catechin）组成，结构复杂，不能水解，加酸加热能产生一种缩合物质--鞣酐（或名鞣红Phlobaphenes），中草药中的鞣质多数属于缩合鞣质。对1倍子鞣质的结构有不同看法，一般认为代表性的结构式为β-五-间双没食子酰葡萄糖。因为没有固定的聚合度，因此分析起来比较棘手。

针对于缩合鞣质，一般分析思路为：

1、通过酸解将缩合单宁水解为黄酮类单体，再通过HPLC分析单体的重量及含量；

2、通过13C-NMR分析缩合单宁中可能存在的键合结构；

3、通过MALDI-TOF分析缩合单宁的聚合度；

4、即使经过上述步骤，只能获得缩合单宁的单体信息，键合信息、聚合度，亦不能解析缩合单宁的缩合顺序。

华士特生物采用UPLC配合Q Exactive 质谱仪建立了单宁类物质的靶向定量检测方法，该方法检测限低、重复性好、定性定量准确。

业务流程

样本要求

1.取材要求

A 时间一致性原则

同一批次样本取材时间尽量保持一致，控制在1h之内。

B 生理一致性原则

同一批次样本取材生理位置保持一致，例如第四片展开页，第五茎节等。

C 地理位置一致性原则

同一批次样本生长环境保持一致，温室苗、盆栽苗、大田苗应区分。

D 迅速性原则

取材要迅速，需要冷藏或干燥的要快速冷却或失水处理。

2.样品类型

新鲜植物样本：2-10g；固体样本：1-5g；液体样本：0.2-5ml；粪便样本：0.2-2g；土壤样本：5-20g。

3.储存和运输

新鲜样本以干冰运输（以3-4公斤干冰挥发一天计算，请使用足量的干冰运输）。

植物单宁广泛地存在于植物的叶、果实、根及树皮等部位中,是重要的天然多酚类活性物质,也是天然产物中研究得比较早和较多的一类化合物。不同物种中的单宁因其化学结构不同用途也各不相同,水解类单宁如没食子酸单宁和鞣花单宁,生物活性较强,在制药、食品、化工等领域应用广泛。缩合类单宁其重要的组成单元是黄烷-3-醇和原花青定,如黑荆树皮单宁、落叶松树皮单宁表现出不同于水解类单宁的特征,在化工、材料等领域虽有应用,但应用面较窄。

华士特生物可提供总单宁含量、系列单宁单体含量、单宁分子量等检测服务，方法科学、准确，欢迎咨询送检。

针对于缩合鞣质, -般分析思路为:

1.通过酸解将缩合单宁水解为黄酮类单体,再通过HPLC分析单体的重量及含量;

2、通过13C-NMR分析缩合单中中可能存在的键合结构;

3、通过MALDI-TOF分析缩合单宁的聚合度;

4、即使经过上述步骤,只能获得缩合单宁的单体信息,键合信媳聚合度,亦杯能解析缩合单单的缩合顺序。