胞外囊泡粒径及浓度技术服务-科锐诺(图)

产品编号:123508315 修改时间:2024-03-31 14:25
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国际细胞外囊泡学会(ISEV) 在2014年的提议,对于提取获得的外泌体,需要通过以下手段进行确认:

双层囊膜结构是外泌体重要标志之一,但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可达0.1 ~ 0.2 nm,可将被观察物体放大至数百万倍,胞外囊泡粒径及浓度技术服务,非常适合进行外泌体双层囊膜超微结构观测。

表观生物技术团队拥有丰富的外泌体电镜样本处理与鉴定经验,可为客户提供高质量外泌体TEM检测服务,获得样本中外泌体典型形态特征图片 (如图一)。



外泌体分离提取方案。主要方案包括:

1、差速超1速离心法;

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;

2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法;

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;

3、超滤提取法;

适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。


外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、NTA检测(粒径及浓度鉴定)、WB(分子标志物)。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。







据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体鉴定3个标志:透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白标志物(Western Blot, WB)。

外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态,判断样本是否含有外泌体。

外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,可观测样本中是否存在外泌体样结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形),同时可测量外泌体大小。

检测平台:TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN

检测结果:三张透射电镜图片,尽可能体现完整的外泌体形态(如有)

检测周期:10-15个工作日





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