蛋白亚细胞定位技术服务推荐「迈斯普」

产品编号:110210388 修改时间:2021-10-26 03:25
所属公司: 武汉迈斯普生物科技有限公司 更多产品
公司主营: 外泌体技术服务,纳米流式检测服务,原位杂...
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武汉迈斯普生物科技有限公司是一家专业从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。如果用传统的电子显微法、荧光显微法等进行亚细胞定位,要耗费大量的人力物力。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向全国提供的生物技术服务。


而在对细胞内不同隔室间信号传递的分析中发现,大型细胞隔室的作用非常突出,特别是跟分泌途径相关,或者不同隔室之间信号传递有关。蛋白组数据及基于的荧光成像技术,为人类细胞的亚细胞结构定位提供了目前为止为的综合性数据。亚细胞定位技术服务实验流程:构建载体——测序验证成功后转大肠——扩增大肠——获得大量载体——PCR——构建表达载体——转化农、注射/转化拟南芥/原生质体——取样品共聚焦观察。上述结果收录在The Cell Atlas中,成为人类蛋白组计划(Human Protein Atlas)框架内的重要组成部分。





蛋白亚细胞定位主要有两种方法,一种是结果准确但费时费力的实验验证方法,如荧光蛋白标记与Western/SDS-PAGE等;第二种方法是通过生物信息学手段,借助计算机对蛋白的亚细胞定位信息进行预测,这种方法可以在短时间获得大量蛋白的预测信息,而我们今天介绍的是便是第二种方法。目前常用的亚细胞定位分析软件主要采用三种分析策略:N端排序或信号分子序列分析;氨基酸序列组成分析;结合多种策略(N端信号序列,氨基酸序列组成,功能域,相似度,GO分类)的分析。实验流程:实验细节沟通——订单/实验材料确认,签订合同——全基因合成或者基因*(如果客户未提供测序完成的目标基因)——实验设计——过表达载体构建——遗传转化/瞬时转化——激光共聚焦观察拍摄照片亚细胞定位(后两步为可选项)。






原理:构建编码目bai标蛋白和荧光蛋du白的融合蛋白的载体,转染细胞,表zhi达,然后激光共聚焦显微镜dao观察荧光信号所在位置,即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意做空载荧光蛋白的对照。

具体步骤:构建目标蛋白与GFP的融合蛋白的瞬时表达载体,基因枪轰击洋葱内表皮细胞,或化学(PEG)转化原生质体,瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置,当然激光共聚焦图片会更漂亮。




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