中净环球净化可提供PCR实验室(www.ccg-sz.com/shiyanshizhuangxiugongcheng/13-80.html)、检测实验室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。
为避免交叉污染,PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区进行。
气流组织:
1、原始试剂混配室应为正压间,在微环境百级超净台内操作,须防止其它程序功能间对本操作间的污染;
2、DNA提取室应为微负压间,须设置排风系统,以防止核酸提取时可能产生的气溶胶对人员的侵害和对其它程序功能间的扩散污染;
3、PCR扩增室应为微负压间,须设置排风系统,以防止大量扩增产物对其它程序功能间的扩散污染;
4、检测室应为微负压间,须设置排风系统,以防止扩增产物在电泳测序过程中的扩散污染;同时因3130分析仪散热量较大,会提高室内温度3-5℃
PCR实验室目前的主要设计依据:
《临床基因扩增检验实验室工作规范》;
《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》;
《临床基因扩增检验实验室设置标准》;
《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》;
《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》。
《法庭科学DNA实验室规范》;
《法庭科学DNA实验室检验规范》
《基因检验实验室技术要求》国家质监检验总局SN/T 1193-2003
《生物安全实验室建筑技术规范》GB50346-2011;
《实验室生物安全通用要求》GB19489-2008;
《洁净厂房设计规范》GB50073—2013;
《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》WS233-2002 中华人民共和国卫生部;
实验室规范《JGJ91 科学实验室建筑设计规范》等。
PCR技术令人头痛的问题是污染,极其微量的污染即可造成假阳性的结果。如果形成气溶胶污染扩散,则可引起整个PCR实验室的污染,处理起来非常棘手,甚至要关闭实验室。
严格执行各区功能划分
1.试剂储存和准备区:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
2.标本制备区:核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作,应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。
3.扩增区:cDNA合成、DNA扩增及检测。
4.扩增产物分析区:扩增片段的进一步分析测定,如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。